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  • 吉姆萨染色液(Giemsa stain,染色体专用) 100ml  科研实验试剂
    吉姆萨染色液(Giemsa stain,染色体专用) 100ml  科研实验试剂
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商品参数
    商品描述

    吉姆萨染色液(Gie m sa stain,1:9,染色体专用)

    产品简介:

    吉姆萨色素(又称姬姆萨色素)是由天青Ⅱ与伊红混合而成,Gie msa 染色原理和结果与 瑞氏染色基本相同,姬姆萨染色液对胞浆着色力较强,能较好的显示胞浆的嗜碱性程度,特 别是对血液和骨髓细胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜碱性颗粒,着色清晰,但是对胞核着色偏深, 核结构显色不佳,故姬姆萨染液常与瑞氏染液联合使用。Yuan ye Gie msa Stain 以进口的 姬姆萨色素、甲醇为主要原料,含 Yuan ye 特有衬染剂,经研磨配制而成,能呈现出清晰 的细胞染色效果,经常用于组织切片、血液和细胞涂片、细菌、染色体显带、原生动物寄生 虫等染色。嗜酸性颗粒为碱性蛋白质,与酸性染料伊红结合,染粉红色,称为嗜酸性物质; 细胞核蛋白和淋巴细胞胞浆为酸性,与碱性染料美蓝或天青结合,染紫蓝色,称为嗜碱性物 质;中性颗粒呈等电状态与伊红和美蓝均可结合,染淡紫色,称为中性物质。

    Yuan ye Gie msa Stain(1:9,染色体专用)由 10×储存液和磷酸盐缓冲液组成,1:9 混 合成工作液后使用,主要用于染色体 G 带染色,染色体显带是指经物理、化学处理后,用 染料对染色体进行分化染色使其呈现深浅不同的特定的带纹的方法。

    产品组成:

    编号 100 ml 500 ml Storage

    名称 试剂(A): Gie msa Stain 储存液(10×) 10 ml 50 ml RT 避光

    试剂(B): 磷酸盐缓冲液 100 ml 500 ml RT

    使用说明书 1 份

    自备材料:

    1、 P H A、秋水仙素

    2、 0.075 M 氯化钾溶液

    3、 恒温培养箱

    4、 固定液(甲醇:冰乙酸=3:1)

    5、 载玻片

    6、 显微镜 操作步骤(仅供参考):

    1、配制 Gie msa 工作液:按试剂(A):试剂(B)=1:9 混合,即取 1 份 Gie msa Stain 储存液(10 ×)加入到 9 份的磷酸盐缓冲液中充分混匀,即为 Giem s a 工作液,该工作液为即用型试 上海源叶生物科技有限公司 400-666-5481 www.shyuanye.com 剂,不易保存,即用即配。如效果不佳,可改变配制比例。

    2、培养:取人类外周血 3~5 ml 在 P H A(一般工作浓度约 60μ g/ ml)、血清等条件下体外培 养 3 天,加入 Brd U 和(或)秋水仙素(一般工作浓度约 0.5μ g/ ml),培养 30 ~60 min 并收 集细胞即 2000g 离心 5 min,留取沉淀。

    3、低渗:加入 5~8 ml 提前 37℃预热的 0.075 M 氯化钾溶液 37℃低渗处理 20 ~ 30 min。

    4、固定:加入 1 ml 新配制的固定液(甲醇:冰乙酸= 3:1),轻轻混匀,2000 g 离心 5 min, 留取沉淀;再次加入 2 ~3 ml 新配制的固定液(甲醇:冰乙酸=3:1),轻轻混匀,室温固 定 15 ~ 20 min,2000 g 离心 5 min,留取沉淀;再次加入 2~3 ml 新配制的固定液,重 复该步骤,留取沉淀。

    5、滴片:加入少许新配制的固定液(甲醇:冰乙酸=3:1)至沉淀中,轻轻混匀制成细胞悬 液。滴加 2 ~3 滴细胞悬液于提前遇冷的载玻片上,吹散水蒸气熏蒸促使细胞破裂(亦可 高空垂直滴下细胞悬液促使细胞破裂),70℃烤片 2h。

    6、消化:用 0.025 ~ 0.05 %的胰蛋白酶溶液处理玻片 30 ~ 9 0 min,依据胰蛋白酶的浓度、 批次等应摸索处理时间。

    7、染色:滴加 Gie msa 工作液覆盖玻片,室温滴染 15~30 min。

    8、用自来水或蒸馏水缓慢从玻片一端冲洗,干燥、镜检。

    注意事项:

    1、涂片染色中 Gie msa 染色后,请勿先去除染液或直接对涂片用力冲洗。

    2、如果染色过深或过浅,应调整染色时间或工作液浓度。

    3、p H 值对染色有一定影响,载玻片应清洁、无酸碱污染,以免影响染色效果。

    4、染色液经稀释后液面应金属光泽则表示染液有染色作用,否则染色液可能失效。

    5、0.5 %乙酸分化常用于 Gie msa 组织切片染色,如有必要亦可用于细胞涂片,但其浓度应 适量下调,0.5 %乙酸分化切片时,切片呈粉红色即可终止;Gie msa 组织切片染色中, 无水乙醇脱水要迅速,否则切片易褪色。

    6、染色液可重复使用,但不能多次重复,若有沉淀物应过滤后使用。

    有效期:24 个月有效

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