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抗酸菌(诺卡菌和红球菌等)染色,可鉴别抗酸菌与非抗酸菌荧光显微镜下抗酸菌呈亮黄色,非抗酸杆菌和背景呈暗黄色。主要由金胺O-罗丹明染色液、脱色液、复染液组成。
分枝杆菌的细胞壁内含有大量脂质包围在肽聚糖的外面, 所以分枝杆菌一般不易着色。传统的染色方法要经过加热和延长染色时间来促使其着色。分枝杆菌中的分枝菌酸与染料一旦结合后，就很难被酸性脱色液脱色，故名抗酸染色。其中具代表性是结核杆菌Ziehl－Neelsen染色法，该法是WHO推荐热染的方法。
