土壤脲酶（S-UE）活性检测试剂盒(微量法)
产品组成：
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
试剂一 | 液体 2 mL×1 瓶（自备） | 2-8℃保存 |
试剂二 | 粉剂×2 瓶 | 2-8℃保存 |
试剂三 | 液体 20mL×1 瓶 | 2-8℃保存 |
试剂四 A 液 | 液体 1 mL×1 支 | 2-8℃保存 |
试剂四 B 液 | 液体 4 mL×1 瓶 | 2-8℃保存 |
试剂五 | 液体 0.3 mL×1 瓶 | 2-8℃保存 |
标准品 | 液体 1 mL×1 支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制：
1、 试剂一：自备甲苯；
2、 试剂二：临用前取 1 瓶加入 2.7 mL 蒸馏水，充分溶解待用，用不完的试剂 2-8℃保存 4 周；
3、 试剂四：临用前将 A 液和 B 液按体积比 1：4 混合待用；用多少配多少；
4、 试剂五：液体置于试剂瓶内 EP 管中，使用前需先离心。临用前加入 5.7 mL 蒸馏水，混匀，待用；用不完的试剂 2-8℃保存两周；
5、 标准品：1 mg/mL 氮标准液。
产品说明：
S-UE 能够水解尿素，产生氨和碳酸。土壤脲酶活性与土壤的微生物数量、有机物质含量、全氮和速效氮含量呈正相关。土壤脲酶活性反应了土壤的氮素状况。利用靛酚蓝比色法测定脲酶水解尿素产生的 NH3-N。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增 加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、30-50目筛、研钵、 冰、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。
操作步骤：
一、 样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献） 新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干，过 30~50 目筛。
二、 测定步骤
1、分光光度计/酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 630nm，分光光度计用蒸馏水调零。
2、培养
试剂名称 | 测定管 | 对照管 |
风干土样(g) | 0.05 | 0.05 |
试剂一（μL） | 20 | 20 |
振荡混匀，使土样全部湿润，室温放置 15min |
试剂二（μL） | 90 | - |
蒸馏水（μL） | - | 90 |
试剂三（μL） | 190 | 190 |
混匀，放入 37℃水浴或恒温培养箱培养 24h 后，10000g 常温离心 10min，取上清液。 |
3、将培养结束的上清液稀释10倍（取0.1mL上清液，加入0.9mL蒸馏水）。若最终计算得到的ΔA仍大于1则继续 稀释。
4、标准品的准备：吸取适量的标准溶液，用蒸馏水稀释至10、8、6、4、2、1、0.5、0（空白管）μg/mL，可参考 下表。
序号 | 稀释前浓度（μg/mL） | 标准液体积（μL） | 蒸馏水体积（μL） | 稀释后浓度（μg/mL） |
1 | 1000 | 15 | 1475 | 10 |
2 | 10 |
|
