半纤维素含量检测试剂盒说明书
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
提取液一 | 液体 60 mL×1 瓶 | 常温保存 |
提取液二 | 液体 60 mL×1 瓶 | 常温保存 |
试剂一 | 液体 100 mL×1 瓶（自备） | 4℃保存 |
试剂二 | 液体 10 mL×1 瓶 | 4℃保存 |
标准品 | 粉剂×1 支 | 4℃保存 |
溶液的配制：
1、 试剂一：80%乙醇自备；
2、 标准品：10 mg D-木糖。临用前加入 1 mL 蒸馏水溶解配制成 10 mg/mL 的标准溶液。
产品说明：
半纤维素是指在植物细胞壁中与纤维素共生、可溶于碱溶液，遇酸后远较纤维素易于水解的那部分植物多糖， 广泛存在于植物中，其分布因植物种属、成熟程度、早晚材、细胞类型及其形态学部位的不同而有很大差异。一种植物往往含有几种由两或三种糖基构成的半纤维素，其化学结构各不相同。半纤维素是一种新型的可利用能源。
技术指标：
最低检出限：0.1516 mg/mL
线性范围：0.2-1 mg/mL
注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
天平、可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、恒温水浴锅、微量玻璃比色皿/96孔板、可调式移液枪、研钵、30~50 目筛、蒸馏水、EP管。
操作步骤：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
样本自然风干或用烘箱烘干至恒重，研钵充分研磨后，过 30~50 目筛。
二、测定步骤
1、 分光光度计/酶标仪预热30 min以上，调节波长至540 nm，蒸馏水调零。
2、 将标准品用蒸馏水稀释至1、0.9、0.8、0.6、0.4、0.2 mg/mL标准液。
3、 操作表（在1.5 mL EP管中操作）：
试剂名称 | 空白管 | 测定管 | 标准管 |
样本（g） | | 0.05 | |
试剂一（μL） | | 1000 | |
漩涡混匀，90℃水浴10 min，25℃，8000 g离心10 min，弃上清留沉淀 |
蒸馏水（μL） | | 1000 | |
漩涡混匀，25℃，8000 g离心10 min，弃上清，此步骤重复三次，取沉淀，烘干至恒重 |
提取液一（μL） | 500 | 500 | |
90℃水浴1 h，自然冷却至室温 |
提取液二（μL） | 500 | 500 | |
漩涡混匀，25℃，8000 g离心10 min，取上清待测 |
上清液（μL） | 80 | 80 | |
标准液（μL） | | | 80 |
试剂二（μL） | 80 | 80 | 80 |
蒸馏水（μL） | 160 | 160 | 160 |
漩涡混匀，90℃水浴5 min，自然冷却至室温 |
取 200 μL 反应液于微量玻璃比色皿/96 孔板中，在 540 nm 下测定吸光值 A，分别记为 A 标准、A 测定、A 空白，计算 ΔA 标准=A 标准-A 空白，ΔA 测定=A 测定-A 空白。（空白管只需测定 1-2 次） |
三、半纤维素含量计算
1、标准曲线的绘制：
以各个标准溶液的浓度为x轴，其对应的ΔA标准为y轴，绘制标准曲线，得到标准方程y= kx+b，将ΔA带入方程得到x（<
