产品简介：

叶绿体(Chloroplast)是光合作用的细胞器，在光合作用研究中，常需要用提取的叶绿

体展开下游研究工作，叶绿体中所含的色素主要有两大类，叶绿素(包括叶绿素a和叶绿素

b)和类胡萝卜素(包括胡萝卜素和叶黄素)，它们与类囊体膜上的蛋白质结合，成为色素蛋白

复合体，其中叶绿素又称叶绿体色素(Chlorophyll)。

Leagene叶绿素(Chlorophyll)检测试剂盒(比色法)检测原理是叶绿素不溶解于水，而

溶于有机溶剂，以有机溶剂粗提叶绿素，根据朗伯-比尔定律，某有色溶液的吸光度(A)与其

中溶质浓度(C)和液层厚度(L)成正比，即A=αCL，其中α为比例常数，当溶液浓度以百分比

浓度为单位，层液厚度为1cm时，α为该物质的吸光系数，在该试剂盒情况下叶绿素a和

叶绿素b在665nm、649nm处有最大吸收波，根据经验公式可计算出叶绿素a、叶绿素b

及总叶绿素含量，该试剂盒主要用于植物组织中叶绿素的提取以及定量检测叶绿素a、叶绿

素b及总叶绿素含量。该试剂盒仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。

产品组成：

编号 名称TP1053Storage

试剂(A):ChlorophyllAssayBuffer 530mlRT

试剂(B):提取粉剂 3gRT

使用说明书1份

自备材料：

1、研钵或匀浆器

2、离心管

3、滤纸或纱布

4、比色杯

5、分光光度计

操作步骤(仅供参考)：

1、叶绿素提取：

①取菠菜或其他植物新鲜叶片，洗净，擦干，去中脉，称取剪碎的新鲜样品0.1g，置于

研钵或匀浆器，加入少量提取粉剂(约50mg)和1mlChlorophyllAssayBuffer，研磨或

匀浆成液态。

②将研磨液或匀浆液转移至10ml离心管，用少量ChlorophyllAssayBuffer冲洗研钵

或匀浆器数次，最后连残渣一同倒入10ml离心管，补加ChlorophyllAssayBuffer至

10ml，混匀，避光放置5min～2h。注：也可将组织剪碎，加入ChlorophyllAssayBuffer，

避光放置12~36h，期间晃动数次，使组织与提取试剂充分接触，当组织接近白色，即

表示色素提取完成，可直接进行测定。

2、观察底部组织残渣接近于白色，即为提取完全，如果仍有较多组织颜色，应再加入

ChlorophyllAssayBuffer继续避光放置。

3、滤纸或三层纱布过滤，留取滤液，即为叶绿素粗提液。

4、Chlorophyll测定：取叶绿素粗提液加入光径为1cm的比色杯，以ChlorophyllAssay

Buffer调零，分光光度计测定粗提液在665nm、649nm处吸光度(A₆₆₅、A₆₄₉)。

计算：

叶绿素a含量(mg/g)=C_a×V×N/(W×1000)

叶绿素b含量(mg/g)=C_b×V×N/(W×1000)

总叶绿素含量(mg/g)=C_T×V×N/(W×1000)

式中：C_a=13.95×A₆₆₅-6.88×A₆₄₉(mg/L)

C_b=24.96×A₆₄₉