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  • D-木糖含量检测试剂盒(微量法)  科研用品
    D-木糖含量检测试剂盒(微量法)  科研用品
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  • D-木糖含量检测试剂盒(微量法) 科研用品

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商品参数
    商品描述

    D-木糖含量检测试剂盒说明书

    微量法

    产品组成:

    试剂名称

    规格

    保存条件

    提取液

    液体 55 mL×1

    2-8℃保存

    试剂一 A

    粉剂×4

    常温保存

    试剂一 B

    液体 40 mL×1

    2-8℃保存

    标准品

    粉剂×1

    2-8℃保存

    溶液的配制:

    1、 试剂一的配制:临用前取一瓶试剂一 A 加入 10mL 试剂一B,溶解后备用,2-8℃保存一周,若试剂变黄色则已经变质,不能继续使用。

    2、 标准品:10mg 木糖。临用前加入 1 mL 蒸馏水配制成 10mg/mL 木糖标准溶液备用。

    产品说明:

    木糖是一种戊糖。天然D-木糖是以多糖的形态存在于植物中。木糖可以活化人体肠道内的双岐杆菌并促其生长,双歧杆菌是益菌,该菌越多越有益人体健康,食用木糖能改善人体的微生物环境,提高机体的免疫能力;同时木糖在小肠上段吸收后不参与体内的代谢,经肾脏排出。因此,D-木糖的吸收一直作为小肠吸收不良的重要功能指标。

    D-木糖在强酸条件下水解产生糠醛,糠醛可与间苯三酚反应生成粉红色化合物,在554 nm处有特殊吸收峰,据此可由吸光值计算出样本中木糖的含量。
    技术指标:

    最低检出限:0.0007 mg/mL

    线性范围:0.0078-0.9 mg/mL

    注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

    需自备仪器和用品

    可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、鼓风烘箱、微量玻璃比色皿/96孔板、可调式移液枪、研钵/ 匀浆器、30-50目筛、EP管、冰和蒸馏水。

    操作步骤:

    一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)

    1、植物样本:将供试的植物样本在 65℃的鼓风烘箱中烘干,研磨成粉状,过 30-50 目筛。按质量g:提取液体积mL1 : 50~100 比例建议称取 10mg 烘干样本,加入 0.5 mL 提取液,涡旋混匀,在 100℃水浴锅中准确水解 2 h,然后 10000 rpm,室温离心 15 min,弃沉淀,取上清液待测。

    2、组织样本:按质量g:提取液体积mL1 : 5~10 比例建议称取 0.05g 样本,加入 0.5 mL 提取液), 研磨匀浆后,在 100℃水浴锅中准确水血清2 h,然后于 10000 rpm,室温离心 15 min,弃沉淀,取上清液待测。

    3、(浆)等液体样本:直接测定。

    二、测定步骤

    1、 分光光度计/酶标仪预热30 min以上,调节波长至554 nm,分光光度计用蒸馏水调零。

    2、 标准液的稀释:将标准品用蒸馏水稀释至0.80.50.250.1250.06250.031250.015625mg/mL的标准溶液备用。

    3、 标准液稀释可参考下表:

    序号

    稀释前浓度(mg/mL

    标准液体积(μL

    蒸馏水体积(μL

    稀释后浓度(mg/mL

    1

    10

    100

    900

    1

    2

    1

    160

    40

    0.8

    3

    1

    200

    200

    0.5

    4

    0.5

    200

    200

    0.25

    5

    0.25

    200

    200

    0.125

    6

    0.125

    200

    200

    0.0625

    7

    0.0625

    200

    200

    0.03125

    8

    0.03125

    200

    200

    0.015625

    实验中每个标准管需50μL 标准溶液。

    4、 操作表(在0.6 mL EP管中操作):

    试剂名称(μL

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