
产品组成:
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
提取液 | 液体 55 mL×1 瓶 | 2-8℃保存 |
试剂一 A | 粉剂×4 瓶 | 常温保存 |
试剂一 B | 液体 80 mL×1 瓶 | 2-8℃保存 |
标准品 | 粉剂×1 支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
1、 试剂一的配制:临用前取一瓶试剂一 A 加入 20mL 试剂一B,溶解后备用,2-8℃保存一周,若试剂变黄色则已经变质,不能继续使用。
2、 标准品:10mg 木糖。临用前加入 1 mL 蒸馏水配制成 10mg/mL 木糖标准溶液备用。
产品说明:
木糖是一种戊糖。天然D-木糖是以多糖的形态存在于植物中。木糖可以活化人体肠道内的双岐杆菌并促其生长,双歧杆菌是益菌,该菌越多越有益人体健康,食用木糖能改善人体的微生物环境,提高机体的免疫能力;同时木糖在小肠上段吸收后不参与体内的代谢,经肾脏排出。因此,D-木糖的吸收一直作为小肠吸收不良的重要功能指标。
D-木糖在强酸条件下水解产生糠醛,糠醛可与间苯三酚反应生成粉红色化合物,在554 nm处有特殊吸收峰, 据此可由吸光值计算出样本中木糖的含量。
技术指标:
最低检出限:0.0007 mg/mL
线性范围:0.0039-0.4 mg/mL
注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备设备和用品
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、鼓风烘箱、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、30-50 目筛、EP管、冰和蒸馏水。
操作步骤:
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
1、植物样本:将供试的植物样本在65℃的鼓风烘箱中烘干,研磨成粉状,过30-50目筛。按质量(g):提取液体积(mL)1 : 50~100比例(建议称取20mg烘干样本,加入1.0 mL提取液),涡旋混匀,在100℃水浴锅中准确水解2 h。然后10000 rpm,室温离心15 min,弃沉淀,取上清液待测。
2、组织样本:按质量(g):提取液体积(mL)1 : 5~10比例(建议称取0.1g样本,加入1.0 mL提取液),研磨匀浆后,在100℃水浴锅中准确水解2 h,然后于10000 rpm,室温离心15 min,弃沉淀,取上清液待测。
3、血清(浆)等液体样本:直接测定。
二、测定步骤
1、 分光光度计预热30 min以上,调节波长至554 nm,蒸馏水调零。
2、 标准液的稀释:将标准品用蒸馏水稀释至0.4、0.25、0.125、0.0625、0.03125、0.015625、0.0078mg/mL的标准溶液备用。
3、 标准液稀释可参考下表:
序号 | 稀释前浓度(mg/mL) | 标准液体积(μL) | 蒸馏水体积(μL) | 稀释后浓度(mg/mL) |
1 | 10 | 100 | 900 | 1 |
2 | 1 | 200 | 300 | 0.4 |
3 | 1 | 250 | 750 | 0.25 |
4 | 0.25 | 500 | 500 | 0.125 |
5 | 0.125 | 500 | 500 | 0.0625 |
6 | 0.0625 | 500 | 500 | 0.03125 |
7 | 0.03125 | 500 | 500 | 0.015625 |
8 | 0.015625 |
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