土壤α-葡萄糖苷酶（S-α-GC）活性检测试剂盒说明书
可见分光光度法
产品组成：
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
试剂一 | 液体 2 mL×1 瓶（自备） | 2-8℃保存 |
试剂二 | 粉剂×2 瓶 | -20℃保存 |
试剂三 | 液体 30 mL×1 瓶 | 2-8℃保存 |
试剂四 | 液体 60 mL×1 瓶 | 2-8℃保存 |
标准品 | 液体 1 mL×1 支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制：
1、试剂一：自备甲苯，2-8℃保存；
2、试剂二：临用前取 1 瓶加入 10mL 蒸馏水，充分溶解备用，用不完的试剂-20℃分装保存 4 周；
3、标准品：5 mmol/L 的对硝基苯酚溶液。
产品说明：
S-α-GC能够催化水解芳基或烃基与糖基原子团之间的糖苷键生成葡萄糖，是纤维素分解酶系中重要组成成分 之一，在土壤微生物的糖类代谢方面具有重要生理功能。
S-α-GC能够催化对-硝基苯-α-D-吡喃葡萄糖苷生成对-硝基苯酚，后者在400nm有特征光吸收。
注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、恒温培养箱/水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、30-50目筛、研钵、甲苯和蒸馏水。
操作步骤：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可参考文献）
新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干，过 30-50 目筛。
二、测定步骤
1、分光光度计预热30min，调节波长至400nm，蒸馏水调零。
2、标准品：取20μL 5mmol/L的对硝基苯酚溶液，加入980μL蒸馏水，充分混匀，配制成100μmol/L标准液使用，现用现配。（实验中每管需要500μL，为减小实验误差，故配制大体积）
3、 加样表：
试剂名称 | 测定管 | 对照管 | 标准管 | 空白管 |
风干土样（g） | 0.1 | 0.1 | - | - |
试剂一（μL） | 25 | 25 | - | - |
振荡混匀，使土样润湿，室温放置15min | - | - |
试剂二（μL） | 400 | - | - | - |
试剂三（μL） | 500 | 500 | - | - |
混匀， 37℃水浴1h 后，立即沸水浴5min（盖紧，防止水分散失），流水/冰浴冷却。 | - | - |
试剂二（μL） | - | 400 | - | - |
10000rpm 25℃离心10min，取上清液 | - | - |
上清液（μL） | 500 | 500 | - | - |
标准品（μL） | - | - | 500 | - |
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