土壤速效钾含量检测试剂盒说明书（可见分光光度法）
产品组成：
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
提取液 | 液体 70mL×1 瓶 | 常温保存 |
试剂一 | 液体 4mL×1 瓶（自备） | 常温保存 |
试剂二 | 液体 5mL×1 瓶 | 2-8℃保存 |
试剂三 A | 液体 15.3mL×1 瓶 | 2-8℃保存 |
试剂三 B | 粉剂×2 瓶 | 2-8℃保存 |
试剂四 | 液体 42mL×1 瓶 | 2-8℃保存 |
标准品 | 液体 1mL×1 支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制：
1、试剂一：自备，甲醛。
2、工作液：临用前在 1 瓶试剂三 B 中加入 4.08mL 试剂三 A，充分溶解，现配现用，用不完的试剂 2-8℃保存一周（每瓶配好的工作液可做 22 管样本测定管试验）。
3、标准液：20 μmol/mL 钾标准液。
产品说明：
速效钾是土壤中易被植物吸收利用的钾素，是表征土壤钾素供应状况的重要指标之一。及时测定和了解土壤速效钾的含量及其变化，对耕地地力评价及对指导钾肥的施用有着重要作用。
钾离子与四苯硼钠作用，形成不溶于水的白色四苯硼钾沉淀，产生的浊度在一定范围内与钾离子浓度成正比， 通过检测其在 420nm 处的浊度来测定土壤速效钾的含量。
K++Sodium Tetraphenylboron Potassium Tetraphenylborate(420nm)
注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、振荡器、1mL 玻璃比色皿、研钵、30-50 目筛、甲醛、蒸馏水。
操作步骤：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
新鲜土样风干，过 30-50 目筛。按照土壤质量（g）: 蒸馏水体积(mL)为 1:5~10 的比例（建议称取约 0.2g 土样，加入 1mL 提取液），振荡提取 1h，10000rpm，25℃离心 10min（若离心后上清中仍有杂质，建议将上清再次离心，至澄清），取上清液待测。
二、测定步骤
1、分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 420nm，蒸馏水调零。
2、临用前将 20 μmol/mL 钾标准液用提取液稀释至 1.2、1、0.8、0.6、0.4、0.3、0.2 μmol/mL 的标准液待测。
3、标准液稀释可参考下表：
序号 | 稀释前浓度（μmol/mL） | 标准液体积（μL） | 提取液体积（μL） | 稀释后浓度（μmol/mL） |
1 | 20 | 100 | 900 | 2 |
2 | 2 | 120 | 80 | 1.2 |
3 | 2 | 500 | 500 | 1 |
4 | 1 | 160 | 40 | 0.8 |
5 | 1 | 120 | 80 | 0.6 |
6 | 1 | 80 | 120 | 0.4 |
7 | 1 | 60 | 140 | 0.3 |
8 | 1 | 40 | 160 | 0.2 |
三、速效钾含量计算
1、标准曲线的绘制：根据标准管的浓度（x，μmol/mL）和吸光度ΔA 标准（y，ΔA 标准），建立标准曲线。根据标准曲线，将ΔA 测定（y，ΔA 测定）带入公式计算样本浓度（x，μmol/mL）。
2、速效钾含量计算：
速效钾含量（mg/kg）=x×10-3 ×V 样总÷W×39=0.039x ÷W
10-3：单位换算系数，1μmol=10-3 mmol；V 样总：加入提取液体积，1mL；W：样本质量，kg；39：钾离子的相对分子质量。
注意事项：
1. 甲醛为有刺激性气味的有毒物质，建议本试验在通风橱中操作。
2. 提取液刚从低温（4℃）条件取出会有晶体析出，震荡使其溶解即可。
3. 当 A 测定大于 1 时，建议将样本用提取液稀释后再进行测定，计算时需在公式中乘以相应稀释倍数；当 A测定小于 0.1 时，建议适当增加土壤样本质量或减少提取液重新提取后再进行测定。
