产品组成：
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
提取液一 | 液体 110 mL×1 瓶 | 4℃保存 |
提取液二 | 液体 70 mL×1 瓶 | 4℃保存 |
试剂一 | 液体 60 mL×1 瓶（自备） | 4℃保存 |
试剂二 | 液体 3 mL×1 瓶 | 4℃保存 |
试剂三 | 液体 5 mL×1 瓶 | 4℃保存 |
标准品 | 粉剂×1 支 | 4℃保存 |
溶液的配制：
1、试剂一：自备浓硫酸。
2、标准品：10 mg 半乳糖醛酸，临用前加入 0.943 mL 提取液二，配成 50 μmol/mL 的标准液。
产品说明：
果胶是植物细胞壁主要组成成分之一，分为水溶性果胶和不溶性果胶（原果胶或碱溶性果胶）。果胶是一种天然高分子化合物，具有良好的胶凝化和乳化稳定作用，已广泛用于食品、医药、日化及纺织行业。
原果胶在稀酸中水解为可溶性果胶，与原有的可溶性果胶进一步转化为半乳糖醛酸，产物在强酸中与咔唑缩合生成紫红色化合物，在530nm处有特征吸收峰。
技术指标：
最低检出限：0.0237 μmol/mL
线性范围：0.0625-1.5 μmol/mL
注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、浓硫酸、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器和蒸馏水。
操作步骤：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
将组织样本捣碎，按照样本质量(g)和提取液一体积(mL)为 1: 20 的比列（建议取约 0.05g 样本，加入 1mL 提取液一），置于 90℃恒温水浴锅中浸提 30min，取出冷却后于 5000g、25℃离心 10min，去掉上清，沉淀中再加入 1mL 提取液一重复操作一次，离心后去上清，沉淀中加入 1mL 提取液二，置于 90℃恒温水浴锅中水解 1h，取出冷却后于 8000g、25℃离心 15min，取上清液待测。
二、测定步骤
1、分光光度计预热30min以上，调节波长至530nm，蒸馏水调零。
2、标准品的制备：将50μmol/mL 标准液用提取液二稀释为1.5、1、0.5、0.25、0.125、0.0625 μmol/mL的标准溶液备用。
3、操作表：
试剂名称 | 空白管 | 标准管 | 对照管 | 测定管 |
样本（μL） | - | - | 100 | 100 |
标准品（μL） | - | 100 | - | - |
蒸馏水（μL） | 100 | - | - | - |
试剂一（μL） | 800 | 800 | 800 | 800 |
混匀、90℃放置10min，取出后冷却 |
试剂二（μL） | - | - | 100 | - |
试剂三（μL） | 100 | 100 | - | 100 |
混匀，25℃静置 30min 后测定 530nm 处吸光值，分别记为 A 空白管、A 标准管、A 对照管和 A 测定管。ΔA标准=A 标准管-A 空白管，ΔA 测定=A 测定管-A 对照管。 |
三、总果胶含量的计算
- 标准曲线的绘制：
以各个标准溶液的浓度为x轴，其对应的ΔA标准为y轴，绘制标准曲线，得到标准方程y=kx+b，将ΔA测定带入方程得到x（μmol/mL）。
- 总果胶含量的计算：
总果胶含量(μmol/g 质量)=x×V提取液二÷W=x÷W
V提取液二：加入提取液二的体积，1mL；W：样本质量，g。
注意事项：
1、 浓硫酸具有强腐蚀性，操作时需特别注意，90℃加热、冷却后再打开盖子，以防液体飞溅烧伤。
2、 如果测定吸光值超过线性范围吸光值，可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。
