土壤铵态氮含量检测试剂盒说明书
可见分光光度法
产品组成：
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
提取液 | 液体 50 mL×1 瓶 | -20℃保存 |
试剂一 A | 液体 1 mL×1 支 | 2-8℃保存 |
试剂一 B | 液体 4 mL×1 瓶 | 2-8℃保存 |
试剂二 | 液体 5 mL×1 瓶 | 2-8℃保存 |
标准品 | 液体 1 mL×1 支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制：
1、试剂一：临用前将试剂一 A 加入试剂一 B 中混匀备用，或按比例现用现配；避光 2-8℃可保存 2 周。若变色则不能继续使用。
2、 标准品：100 μg/mL NH +-N 标准液
产品说明：
土壤铵态氮是土壤速效氮的重要组成部分，可以被植物直接吸收利用。铵态氮指标对农业生产具有极其重要的作用。
在强碱介质中，土壤中的铵态氮与次氯酸盐和苯酚作用，生成靛酚蓝染料，在630nm处有特征吸收峰，吸光值与铵态氮含量成正比。
技术指标：
最低检出限：0.0646 μg/mL
线性范围：0.156-5 μg/mL
注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品
可见分光光度计、天平、台式离心机、1mL玻璃比色皿、振荡器、30~50目筛、研钵、恒温水浴锅。
操作步骤：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
按照土样质量（g）：提取液体积（mL）为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 新鲜土样，加入 1mL 提取液），振荡提取 1h，10000g，25℃离心 10min，取上清液待测。（土样要求参考注意事项 1.2.）
二、测定步骤
1、可见分光光度计预热30min，波长调至630nm，蒸馏水调零。
2、标准液稀释：临用前取20μL 100μg/mL氮标准液，加入780μL蒸馏水，充分混匀，配制成2.5μg/mL标准液使用， 现用现配。（实验中每管需要400μL，为减小实验误差，故配制大体积。）
3、加样表：
试剂名称（μL） | 空白管 | 标准管 | 测定管 |
样本 | - | - | 400 |
蒸馏水 | 400 | - | - |
标准品 | - | 400 | - |
试剂一 | 80 | 80 | 80 |
试剂二 | 60 | 60 | 60 |
充分混匀，于室温25℃放置30min |
蒸馏水 | 460 | 460 | 460 |
充分混匀后测定 630nm 处吸光值，记为 A 空白管、A 标准管、A 测定管。计算ΔA 标准=A 标准管-A 空白管，ΔA 测定=A 测定管-A 空白管。标准管和空白管只需测 1-2 次。 |
三、计算公式
注意事项：NH +-N（μg/g 土样）=ΔA测定÷ΔA标准×C标准液×V提取÷W=2.5×ΔA测定÷ΔA标准÷W C标准液：标准液浓度，2.5μg/mL；V提取：提取液体积，1mL；W：样本质量，g。
注意事项：
1、 土壤经风干或者烘干很容易引起铵态氮含量的变化，所以建议采用新鲜土壤进行测定。样品采集后应于 4℃ 下密封运输和保存，并在 3d 内分析完毕。否则，应于-20℃（深度冷冻）下以小块、小份保存，样品中氨氮可以保存数周。当测定深度冷冻氨氮含量时，应控制解冻的温度和时间。室温环境下解冻时，需在 4 h 内完成样品解冻、匀质化和提取；如果在 4℃下解冻，解冻时间不应超过 48 h。
2、如果要比较不同样本间的铵态氮含量，需将土样烘干，按干重计算后再进行比较。
3、如果样本吸光值大于 0.7，建议将样本用提取液稀释后进行测定
