支链淀粉含量检测试剂盒说明书
可见分光光度法
产品组成：
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
试剂一 | 液体 60 mL×1 瓶 | 2-8℃保存 |
试剂二 | 液体 50 mL×1 瓶（自备） | 2-8℃保存 |
试剂三 | 液体 30 mL×1 瓶 | 2-8℃保存 |
试剂四 | - | 2-8℃保存 |
试剂五 | 液体 6 mL×1 瓶 | 2-8℃保存 |
试剂六 | 液体 10mL×1 瓶 | 2-8℃保存 |
标准品 | 粉剂×1 支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制：
1、试剂二：乙醚 50 mL 自备。
2、试剂四：提供 125 mL 空瓶一个；将试剂三：H2O =9 mL：91 mL 混匀，现用现配，2-8℃保存半年。
3、标准品：10 mg 支链淀粉。临用前加入 0.1 mL 无水乙醇和 0.9 mL 试剂三，混匀后封口膜封口，沸水浴至溶解，即 10 mg/mL 的支链淀粉，2-8℃保存半年。
产品说明：
支链淀粉又称胶淀粉，一般由几千个葡萄糖残基组成，淀粉中直链淀粉和支链淀粉的比例和含量对淀粉产品的加工、物化特性、糊化温度等有着直接的影响。
支链淀粉和碘形成红紫色络合物，利用乙醇分开样本中的可溶性糖和淀粉，再用碘与其反应得到支链淀粉含量。
Amylopectin + Iodine Red Violet Complex (530nm、755nm)
技术指标：
最低检出限：0.0044 mg/mL
线性范围：0.0125-0.5 mg/mL
注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、天平、台式离心机、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、乙醚、无水乙醇、EP 管。
操作步骤：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
1、称取 0.005g 烘干样本，加入 1mL 试剂一，充分匀浆；
2、80℃水浴提取 30min，3000g，25℃离心 5min，弃上清，留沉淀；
3、在步骤 2 沉淀中加入 1mL 试剂二（乙醚）振荡 5min；3000g，25℃离心 5min，弃上清，留沉淀；
4、在步骤 3 沉淀中加入 5mL 试剂四充分溶解，90℃水浴 10min，冷却后 3000g，25℃离心 5min，取上清待测。
二、测定步骤
1、 分光光度计预热 30min 以上，调节双波长至 530nm 和 755nm，蒸馏水调零。
2、 标准液的稀释：将 10 mg/mL 的标准溶液用试剂四稀释至 0.5、0.4、0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125 mg/mL 标准溶液待测。
3、 标准液稀释可参考下表：
序号 | 稀释前浓度（mg/mL） | 标准液体积（μL） | 试剂四体积（μL） | 稀释后浓度（mg/mL） |
1 | 10 | 100 | 1900 | 0.5 |
2 | 0.5 | 800 | 200 | 0.4 |
3 | 0.4 | 500 | 500 | 0.2 |
4 | 0.2 | 500 | 500 | 0.1 |
5 | 0.1 | 500 | 500 | 0.05 |
6 | 0.05 | 500 | 500 | 0.025 |
7 | 0.025 | 500 | 500 | 0.0125 |
备注：实验中每个标准管需 200μL 标准溶液。
4、 操作表：(在 1.5mL 离心管中依次加入下列试剂)
试剂名称 | 测定管 | 标准管 | 空白管 |
样本（μL ） | 200 | - | - |
标准溶液（μL） | - |
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