植物原花青素（OPC）含量检测试剂盒说明书（可见分光光度法）
产品组成：
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
提取液 | 液体 80 mL×1 瓶 | 2-8℃保存 |
试剂一 | 液体 25 mL×1 瓶 | 2-8℃保存 |
试剂二 | 粉剂×1 瓶 | 2-8℃保存 |
标准品 | 粉剂×1 支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制：
1. 试剂二：临用前加 25 mL 提取液，充分溶解。配制好的试剂二应尽快使用，2-8℃保存时间不超过一个月；
2. 标准品：10 mg 原花青素。临用前加入 1mL 提取液，充分溶解得到 10 mg/mL 标准液，2-8℃保存两周；
3. 工作液：临用前按照用量将试剂一和试剂二按照 1:1 混合，现用现配。用多少配多少。
产品说明：
原花色素（Oligomeric Proantho Cyanidins，OPC）是一类黄烷醇单体及其聚合体的多酚化合物，广泛存在于植物的各种器官中，具有极强的抗氧化性和清除自由基的作用，广泛的应用于医药，食品，化妆品，保健品行业。
在酸性条件下，植物原花青素A环上的间苯二酚和间苯三酚与香草醛发生缩合反应，产生有色化合物，在500nm 处有特征吸收峰，测定500nm光吸收值，可计算植物中原花青素的含量。
Vanillin
Oligomeric Proantho Cyanidins (OPC) Colored Compound (500nm)
H+
技术指标：
最低检出限：0.0622 mg/mL
线性范围：0.078-5 mg/mL
注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、天平、台式离心机、粉碎仪、超声清洗仪、30-50目筛和蒸馏水。
操作步骤：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
将样本烘干至恒重，粉碎，过 30-50 目筛之后，称取约 0.1g，加入 1mL 提取液，用超声提取法进行提取（功率 300W，温度 25℃，时间 30min）；12000rpm，25℃，离心 10min，取上清，用提取液定容至 1mL，待测。
二、测定步骤
1. 分光光度计预热30min以上，调节波长至500nm，蒸馏水调零。
2. 标准溶液制备：将10mg/mL标准液用提取液稀释为4、3、2.5、1.25、0.625、0.3125、0.15625mg/mL的标准溶
液。
3. 标准液稀释可参考下表：
序号 | 稀释前浓度（mg/mL） | 标准液体积（μL） | 提取液体积（μL） | 稀释后浓度（mg/mL） |
1 | 10 | 200 | 300 | 4 |
2 | 10 | 150 | 350 | 3 |
3 | 10 | 125 | 375 | 2.5 |
4 | 2.5 | 500 | 500 | 1.25 |
5 | 1.25 | 500 | 500 | 0.625 |
6 | 0.625 | 500 | 500 | 0.3125 |
7 | 0.3125 | 500 | 500 | 0.15625 |
备注：实验中每个标准管需 200μL 标准溶液。
4. 操作表
试剂名称 | 对照管 | 测定管 | 标准管 | 空白管 |
样本（μL） | 200 | 200 | - | - |
标准溶液（μL） | - | - | 200 | - |
工作液（μL） | - | 800 | 800 | 800 |
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