血钙浓度检测试剂盒说明书（可见分光光度法）
产品组成：
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
试剂一 | 液体 10 mL×1 瓶 | 4℃保存 |
试剂二 | 液体 10 mL×1 瓶 | 4℃保存 |
试剂三 | 液体 30 mL×1 瓶（自备） | 4℃保存 |
标准液 | 液体 1 mL×1 支 | 4℃保存 |
溶液的配制：
1、试剂三：自备无水甲醇和丙酮，依次加入 27 mL 无水甲醇和 3 mL 丙酮，盖紧混匀即可；
2、标准液：2μmol/mL CaCl2?2H2O 溶液，临用前用蒸馏水进行 10 倍稀释得到 0.2 μmol/mL 标准溶液。
产品说明：
血钙几乎全部存在于血浆中，所以血钙主要指血浆钙。血浆钙有离子钙和结合钙两种形式，其中只有离子钙直接起生理作用，它与结合钙处于动态平衡，并受血液pH的影响。血钙水平与多种重要的生理功能相关，过高或过低都会影响正常生理功能。本试剂盒用于检测血液中游离钙浓度。
在强碱溶液中游离钙与GBHA反应生成红色钙-GBHA复合物，在520nm有吸收峰；通过测定520nm吸光度，计算游离钙浓度。
技术指标：
最低检出限：0.011 μmol/mL
线性范围：0.025-1 μmol/mL
注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、可调式移液枪、1mL玻璃比色皿、无水甲醇、丙酮和蒸馏水。
操作步骤：
一、测定步骤
1、分光光度计预热30min以上，调节波长到520nm，蒸馏水调零。
2、加样表：
名称（μL） | 空白管 | 标准管 | 测定管 |
血浆 | - | - | 50 |
蒸馏水 | 50 | - | - |
标品 | - | 50 | - |
试剂一 | 200 | 200 | 200 |
试剂二 | 200 | 200 | 200 |
试剂三 | 400 | 400 | 400 |
混匀；静置 5min 后于 520nm 测定吸光度 A，记为 A 测定管、A 空白管、A 对照管。
二、血钙浓度计算
血钙含量(μmol/dL)= [C标准液×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)]×100
=20×(A测定管-A空白管)÷(A标准管-A空白管)
C标准液：0.2 μmol/mL；100：单位换算系数，1dL=100mL。
注意事项：
1、宜早晨空腹采血，并且采血后应该尽快完成测定；
2、尽量在 10min 内完成测定；
3、因反应完成后需尽快测定，建议每批次测定 5-10 个样本；
4、如果样本吸光值大于 1，建议将样本用蒸馏水稀释后进行测定。
