人甲基化/非甲基化DNA标准品

Human Methylated/Non-MethylatedDNASet

产品及特点

甲基化专一 PCR 必须要使用经过亚硫酸氢钠（biosulfite）修饰的DNA作为模板，此修饰反应需要用非甲基化的 DNA 和甲基化的 DNA 作为对照，否则无法判断样品是否甲基化。本产品就是根据此需求而开发，它具有下列特点：

1. 本产品所含的甲基化 DNA 是通过甲基化酶修饰人的基因组DNA而得，电泳呈单一条带。

2. 本产品所含的非甲基化 DNA 是通过以甲基化 DNA 为模板进过多次nestedWGA（全基因组扩增）扩增并纯化制备而得，原来的甲基化位点已经极度稀释。

3. 本产品主要用于检测和优化设计的甲基化引物。

4. 本产品足够 50 次甲基化 PCR，如果每次模板使用量为20ng，每次做一个甲基化和一个非甲基化对照。

5. 本产品只能用于科研。

规格及成分

本产品采用 5 孔盒包装

成份 编号 规格 包装材料

人甲基化 DNA，10ng/uL 100936a 100uL 0.5mL红盖管

人非甲基化 DNA，10ng/uL 100936b 100uL 0.5mL绿盖管

使用手册 100936sc 无 1份

自备试剂

超纯水、基因专一性甲基化 PCR 引物。

运输及保存

常温运输、-20℃保存、有效期一年。

使用方法

1. 按自备试剂对待测 DNA 样本，甲基化 DNA 对照，非甲基化DNA对照进行亚硫酸氢钠修饰和回收。

2. 按下表设置 30uL 甲基化 PCR 反应（本产品不含所需试剂）：

成份 待测样品 阳性对照 阴性对照

2×PCR MagicMix 15 uL 15 uL 15uL

亚硫酸氢钠修饰的 DNA 10-20ng 10-20ng 10-20ng

甲基化 PCR 引物一 0.2-0.5 uM 0.2-0.5 uM 0.2-0.5uM

甲基化 PCR 引物二 0.2-0.5 uM 0.2-0.5 uM 0.2-0.5uM

超纯水 补水到 30 uL 补水到30 uL 补水到30uL

3. PCR 参数需要用户自己根据引物和 PCR 产物的长度决定。

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