维生素 C 检测试剂盒(碘量滴定法)
产品简介:
维生素 C(Vitamin C)又称 L-抗坏血酸,是高等灵长类动物与其他少数生物的必需营养素。在生物体内,维生素 C 是一种抗氧化剂,为酸性己糖衍生物,是稀醇式己糖酸内酯,保护身体免于自由基的威胁,同时也是一种辅酶,其广泛的食物来源为各类新鲜蔬果。Vc有 L-型和 D-型两种异构体,只有 L-型的才具有生理功能,还原型和氧化型都有生理活性。
Leagene 维生素 C 检测试剂盒(碘量滴定法)检测原理是铜盐与过量的碘盐形成碘化铜,而碘化铜不稳定,分解为碘化亚铜和游离碘,其释放出来的游离碘能够氧化维生素 C 形成碘化氢,直到维生素 C 完全被氧化,剩余的微量碘与淀粉指示剂形成蓝色,该法终点明确,简单快速,可准确测量维生素 C 的含量,其误差一般小于 2%。本试剂盒仅用于科研领域,不宜用于临床诊断或其他用途。
产品组成:
编号 | TC2045 | | Storage |
名称 | 25T | |
| |
试剂(A): MPA | 2 瓶 | | RT |
| | | |
试剂(B):5×MPA buffer | 500ml | | RT |
试剂(C): KI 滴定液 | 250ml | | RT 避光 |
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试剂(D): 淀粉指示剂 | 5ml | | 4℃ |
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试剂(E): Cu 标准液(0.01M) | 50ml | | RT |
| | | |
使用说明书 | | 1 份 |
自备材料:
1、组织捣碎器
2、滤纸及漏斗
3、锥形瓶
4、蒸馏水
5、微量碱式滴定管
操作步骤(仅供参考):
1、 配制组织匀浆液:提前半天或 1 天取适量容器,加入 1 瓶 MPA、250ml 5×MPA buffer 以及 970ml 蒸馏水充分混匀,获得组织匀浆液,4℃保存待用,2 周有效。注意:组织匀浆液也低温保存时有可能出现结晶或析出,可温浴溶解。
2、配制 KI 滴定工作液:取适量的 KI 滴定液,按 KI 滴定液:蒸馏水=3:5 的比例配制 KI
滴定工作液,充分混匀;如果维生素 C 样品提取液中维生素 C 含量小于 1mg 时,无需配制工作液,直接用 KI 滴定液进行滴定。
3、制备维生素C样品提取液:食品:清洗干净新鲜蔬菜或水果,用布或吸水纸吸干表面水分或自然晾干,称取 20~50g,加入 50~80ml 组织匀浆液,置于组织捣碎器中打成浆状,滤纸过滤,滤渣可用少量组织匀浆液清洗 1~2 次,合并滤液备用,其总体积不超过120ml;注射液:取0.1ml注射液用9.9ml组织匀浆液稀释;药品片剂:精确称量一片药品的重量,用组织匀浆液稀释,100ml 容量瓶定容,混匀过滤。
4、维生素 C 样品滴定:准确吸取一定体积的上述提取液(如 5ml)置于 100ml 的锥形瓶内,加入 10ml KI 滴定工作液或 KI 滴定液,加入数滴淀粉指示剂,混匀,然后用 Cu 标准液进行滴定,边滴定边摇动,直至呈现蓝色,即为滴定终点,记录滴定量;另取相同量的组织匀浆液作为空白对照滴定。
计算:
维生素 C 含量(mg/份)=(V 样-V 空)×C
式中:V 样=滴定样品所消耗的 Cu 标准液(0.01M)毫升数(ml);
V 空=滴定空白对照所消耗 Cu 标准液(0.01M)的毫升数(ml);
C=0.88=1ml Cu 标准液(0.01M)相当于 0.88mg Vitamin C。
注意事项:
1、 某些水果、蔬菜浆状物泡沫太多,可滴加数滴丁醇或辛醇等。
2、 如果提取物中含有较多色素,滴定时不易看出颜色变化,可用白陶土脱色或加入 1ml氯仿。
3、 如果浆状物不易过滤,可低速离心,留取上清液进行滴定。
4、 配制好的组织匀浆液应严格 4℃密闭保存,2 周有效;注意:组织匀浆液也低温保存时有可能出现结晶或析出,可温浴溶解。
5、待测样品如不能及时测定,应置于 2~8℃保存,3 天内稳定。
6、如果样品浓度过高,应用蒸馏水稀释后重测,结果乘以稀释倍数。
有效期: 12 个月有效。
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