钙检测试剂盒(甲基麝香草酚蓝比色法)
产品简介:
钙(Calcium)是一种金属元素,常温下呈银白色晶体,动物的骨骼、蛤壳、蛋壳都含有碳酸钙,检测生命体钙含量,主要通过检测钙离子浓度实现的,用分光度法检测钙较为常见,该法需要合适的金属指示剂或选择性结合钙离子后引起变色的染料化合物,目前较为常用的染料有邻-甲酚酞络合酮(OCPC)、偶氮砷Ⅲ、甲基麝香草酚蓝(MTB)等。
Leagene 钙检测试剂盒(甲基麝香草酚蓝比色法)是利用溶液中钙离子在碱性条件下能与 MTB 结合,生成藏青色/蓝色的复合物,加入镁离子螯合剂,去除镁离子背景干扰,通过分光光度计检测 610nm 处吸光度,根据公式计算出总钙含量。该试剂盒仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
产品组成:
名称 | | TC1023 | | | |
| | 50T | | Storage | |
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试剂(A): 钙标准(2.5mmo /L) | 1ml | | 4℃ | |
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试剂(B): Ca Ass y Buff r | 50ml | | RT 避光 | |
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试剂(C): MTB 显色液 | 50ml | | 4℃ 避光 | |
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试剂(D): ddH2O | 10ml | | RT | |
使用说明书 | | | 1 份 | |
自备仪器
1、离心管或试管、比色杯、分光光度计
操作步骤(仅供参考):
1、制备样品:
①血浆、血清样品:血浆、血清按照常规方法制备,可以直接用于本试剂盒的测定,-20℃
冻存,用于 Ca 的检测。
②细胞或组织样品:取恰当细胞或组织进行匀浆,低速离心取上清,-20℃冻存,用于Ca 的检测。
③高浓度样品:如果样品中含有较高浓度的 Ca,可以使用 ddH2O 稀释,不宜使用普通蒸馏水稀释。
④(选做)样品准备完毕后可以用 BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度,以便于后续计算单位蛋白重量组织或细胞内 的 Ca
2、配制 Ca 显色工作液:临用前,取 Ca Assay Buffer 和 MTB 显色液等量混合,即为 Ca显色工作液,即配即用;4℃避光保存,不宜久置。
3、 Ca 加样:选用经稀盐酸处理及去离子水清洁的干燥试管或者一次性无菌聚乙烯离心管,按照下表设置空白管、标准管、测定管,溶液应按照顺序依次加入,并注意避免产生气泡。如果样品中的钙离子含量过高,可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定,样品的检测最好能设置平行管。
加入物(ml) | 空白管 | 标准管 | 测定管 |
| | | |
ddH2O | 0.025 | — | — |
钙标准(2.5mmol/L) | — | 0.025 | — |
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待测样品 | — | — | 0.025 |
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Ca 显色工作液 | 2 | 2 | 2 |
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4、 Ca 测定:混匀,室温静置,以空白管调零,比色杯光径 1cm,分光光度计测定标准管、测定管 610nm 处吸光度(即为 A 标准,A 测定)。
计算:
血清、血浆中钙(mmol/L)=(A测定/A标准)×2.5
组织中钙(mmol/mg)=(A测定/A标准)×2.5/待测样品蛋白浓度(mg/L)
式中:A 测定=测定管的吸光度
A 标准=标准管的吸光度
单位换算:m /d =mmo /L/0.411
参考区间:健康成年人血清钙浓度:2.08~2.6mmol/L(8.3~10.4mg/dl)