植物总酚(TP)含量检测试剂盒说明书(微量法)
货号:UPLC-MS-4294规格:100T/48S产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
提取液 | 液体 125 mL×1 瓶(自备) | 常温保存 |
试剂一 | 液体 5 mL×1 瓶 | 2-8℃保存 |
试剂二 | 液体 8 mL×1 瓶 | 2-8℃保存 |
标准品 | 粉剂×1 支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
1、 提取液:自备 60%乙醇,常温保存。
2、 标准品:5mg 没食子酸。临用前加入 1mL 蒸馏水,50℃加热溶解,配制成 5mg/mL 的标准溶液,2-8℃保存两周。
产品说明:
植物酚类物质具有清除自由基,抗氧化抗衰老的作用,具有较高的营养价值和医疗保健作用而广泛应用于化妆品、食品、医药等领域。
在碱性条件下,酚类物质将钨钼酸还原,产生蓝色化合物,在760nm处有特征吸收峰,测760nm处的吸光值,
即可得样本总酚含量。
技术指标:
最低检出限:0.0015 mg/mL
线性范围:0.0024-0.3125 mg/mL
注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、天平、烘箱、粉碎仪/研钵、30-50目筛、超声清洗仪、60% 乙醇、台式离心机、蒸馏水。
操作步骤:
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
将样本烘干至恒重,粉碎,过 30-50 目筛之后,称取约 0.1g,加入 2.5mL 提取液,用超声提取法进行提取, 超声功率 300W,温度 60℃,提取 30min。12000rpm,25℃,离心 10min,取上清,用提取液定容至 2.5mL,待测。二、测定步骤
1. 分光光度计或酶标仪预热30min以上,调节波长至760nm,分光光度计蒸馏水调零。
2. 标准液的稀释:将5mg/mL没食子酸标准溶液用蒸馏水稀释至0.1562、0.0781、0.0391、0.0195、0.0098、0.0049 mg/mL,待测。
- 标准液稀释可参考下表:
序号 | 稀释前浓度(mg/mL) | 标准液体积(μL) | 蒸馏水体积(μL) | 稀释后浓度(mg/mL) |
1 | 5 | 125 | 875 | 0.625 |
2 | 0.625 | 250 | 750 | 0.15625 |
3 | 0.15625 | 200 | 200 | 0.078125 |
4 | 0.078125 | 200 | 200 | 0.0391 |
5 | 0.0391 | 200 | 200 | 0.0191 |
6 | 0.0191 | 200 | 200 | 0.0098 |
7 | 0.0098 | 200 | 200 | 0.0049 |
备注:实验中每个标准管需 10μL 标准溶液。
- 操作表