直链淀粉含量检测试剂盒说明书
可见分光光度法
产品组成：
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
试剂一 | 液体 60 mL×1 瓶 | 2-8℃保存 |
试剂二 | 液体 50 mL×1 瓶（自备） | 2-8℃保存 |
试剂三 | 液体 30 mL×1 瓶 | 2-8℃保存 |
试剂四 | - | 2-8℃保存 |
试剂五 | 液体 1.5 mL×1 支 | 2-8℃保存 |
试剂六 | 液体 10mL×1 支 | 2-8℃保存 |
标准品 | 粉剂×1 支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制：
1、试剂二：乙醚 50 mL 自备；
2、试剂四：提供 125mL 空瓶一个；将试剂三：H2O =9 mL：91 mL 混匀，现用现配，2-8℃保存半年；
3、标准品：10 mg 直链淀粉。临用前加入 0.1 mL 无水乙醇和 0.9 mL 试剂三，混匀后封口膜封口，沸水浴至溶解，即 10 mg/mL 的直链淀粉，2-8℃保存半年。
产品说明：
直链淀粉是D-葡萄糖基以α-(1,4)糖苷键链接的多糖链，直链淀粉含量影响着食品的食用品质和外观品质，与食品安全息息相关。
直链淀粉和碘形成蓝色络合物，利用乙醇分开样本中的可溶性糖和淀粉，再用碘与其反应得到直链淀粉含量。
Amylose + Iodine Blue Complex (485nm、550nm)
技术指标：
最低检出限：0.006 mg/mL
线性范围：0.0125-0.6 mg/mL
注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、天平、台式离心机、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、乙醚、无水乙醇、EP 管、蒸馏水。
操作步骤：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
1、称取 0.01g 烘干样本，加入 1mL 试剂一，充分匀浆；
2、80℃水浴提取 30min，3000g，25℃离心 5min，弃上清，留沉淀；
3、在步骤 2 沉淀中加入 1mL 试剂二（乙醚）振荡 5min；3000g，25℃离心 5min，弃上清，留沉淀；
4、在步骤 3 沉淀中加入 5mL 试剂四充分溶解，90℃水浴 10min，冷却后 3000g，25℃离心 5min，取上清待测。
二、测定步骤
1、 分光光度计预热 30min 以上，调节双波长至 550nm 和 485nm，蒸馏水调零。
2、 标准溶液的稀释：取 40μL 10mg/mL 标准溶液，加入 960μL 试剂四，充分混匀，配制成 0.4mg/mL 标准溶液使用，现用现配。（实验中每管需要 100μL，为减小实验误差，故配制大体积。）
3、 操作表 (在 1.5mL 离心管中依次加入下列试剂) ：
试剂名称 | 测定管 | 标准管 | 空白管 |
样本（μL ） | 100 | - | - |
标准溶液（μL） | - | 100 | - |
蒸馏水（μL） | - | - | 100 |
试剂五（μL） | 20 | 20 | 20 |
试剂六（μL） | 20 | 20 | 20 |
蒸馏水（μL） | 860 | 860 | 860 |
充分混匀，测定 550nm 和 485nm 处的吸光值，550nm 下的测定管、标准管、空白管分别记为 A 测定、A 标准和A 空白，485nm 下的分别记为 A’测定、A’标准、A’空白，计算 ΔA 测定=（A 测定-A 空白）
-（A’测定-A’空白），ΔA 标准=（A 标准-A 空白）-（A’标准-A’空白）。标准管和空白管只需测 1-2 次。
三、直链淀粉含量计算
直链淀粉含量（mg/g 质量）=ΔA 测定÷（ΔA 标准÷C 标准）×V 样总÷W=2×ΔA 测定÷ΔA 标准÷W C 标准：标准溶液浓度，0.4mg/mL；V 样总：加入试剂四体积，5mL；W：样本质量，g。
注意事项
1、反应后建议在 20min 内检测完成防止褪色。
2、若A 测定大于 1，建议样本上清用试剂四稀释后再进行测定；若 A 测定低于 0.03 时，可以提取时减少试剂四体积进行测定。注意同步修改计算公式。
