试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
提取液 | 液体 30 mL×1 瓶 | 2-8℃保存 |
试剂一 | 液体 70 mL×1 瓶 | 2-8℃保存 |
试剂二 | 粉剂×2 瓶 | 2-8℃保存 |
试剂三 | 粉剂×1 瓶 | 2-8℃保存 |
试剂四 | 粉剂×1 瓶 | 2-8℃保存 |
试剂五 | 粉剂×1 瓶 | -20℃保存 |
试剂六 | 液体 12 mL×1 瓶 | 2-8℃保存 |
标准品 | 液体 102 μL×1 支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制：
1、 试剂二：临用前取 1 瓶加入 6 mL 试剂一，充分混匀后备用；用不完的试剂 2-8℃保存 1 周。
2、 试剂三：临用前加入 12 mL 试剂一，充分混匀后备用；用不完的试剂 2-8℃保存 4 周
3、 试剂四：临用前加入 12 mL 试剂一，充分混匀后备用；用不完的试剂 2-8℃保存 4 周。
4、 试剂五：粉剂置于瓶内玻璃管中。临用前加入 12 mL 试剂一，充分混匀后备用；用不完的试剂-20℃分装保存 4 周，避免反复冻融。
5、 标准品：临用前加入 898 μL 蒸馏水得到 1 mmol/mL 的过氧化氢溶液，2-8℃保存 4 周。
6、 工作液 A 的配制：用于样本测定管、空白管及标准管的检测，按照试剂二 : 试剂三 : 试剂四 : 试剂五 :试剂六= 1 : 1 : 1 : 1 : 2 的比例配制，根据样本量现配现用，配后建议 2 小时内用完。
7、 工作液 B 的配制：用于样本对照管的检测，按照试剂二 : 试剂三 : 试剂四 : 试剂五 : 试剂一= 1 : 1 : 1 :1 : 2 的比例配制，根据样本量现配现用，配后建议 2 小时内用完。
产品说明：
尿酸酶，又名尿酸氧化酶，是一种参与嘌呤降解途径的氧化酶，可以将尿酸分解为尿囊酸素进而排出体外。尿酸为嘌呤代谢的终末产物，积累过多将导致通风、肾病、心血管疾病等多种疾病的发生。尿酸酶在尿酸相关疾病的临床检测以及治疗中有着重要意义。
尿酸酶催化尿酸分解为尿囊素、CO2和 H2O2，H2O2氧化亚铁氰化钾中的 Fe2+生成Fe3+，Fe3+进一步与 4-氨基安替比林和酚反应生成红色醌类化合物，在 505 nm 处有特征吸收峰，通过测定 505 nm 处的吸光值来反映尿酸酶的活性
注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、低温离心机、水浴锅/恒温培养箱、1 mL 玻璃比色皿、可调式移液枪、超声破碎仪、研钵/ 匀浆器、冰、EP 管、蒸馏水。
操作步骤：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
组织：按照组织质量（g）: 提取液体积(mL)为 1 : 5~10 的比例（建议称取约 0.1 g 组织，加入 1 mL 提取液） 进行冰浴匀浆，然后 10000 rpm，4℃，离心 10 min，取上清置于冰上待测。
细菌或细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104 个）: 提取液体积（mL） 为 500~1000 : 1 的比例（建议500万个细菌或细胞加入1mL 提取液），冰浴超声波破碎细菌或细胞（功率200W，超声3 s，间隔 7 s，总时间5 min）；然后 10000 rpm，4℃，离心 10min，取上清置于冰上待测。
二、测定步骤
1、 分光光度计预热 30 min 以上，调节波长至 505 nm，蒸馏水调零。
2、 将 1 mmol/mL 标准液用蒸馏水稀释为 0.25 μmol/mL 的标准溶液备用。标准溶液的稀释：取 20μL 1mmol/mL 过氧化氢标准液，加入 1980μL 蒸馏水，充分混匀，配制成 10μmol/mL 标准液，再取 50μL 1mmol/mL 过氧化氢标准液，加入 1950μL 蒸馏水，充分混匀，配制成 0.25μmol/mL 标准液使用，现用现配。（实验中每管需要150μL，为减小实验误差，故配制大体积）。
3、 操作表：(在 1.5 mL 离心管中)
