中性、碱性土壤速效磷含量检测试剂盒说明书
可见分光光度法
产品组成：
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
提取液 | 液体 80 mL×1 瓶 | 2-8℃保存 |
试剂一 | 粉剂×1 瓶 | 2-8℃保存 |
试剂二 | 粉剂×1 瓶 | 2-8℃保存 |
试剂三 | 液体 15 mL×1 瓶 | 常温保存 |
标准品 | 液体 1 mL×1 支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制：
1、试剂一：临用前加入 15 mL 蒸馏水，溶解后 2-8℃保存一周；
2、试剂二：临用前加入 15 mL 蒸馏水，溶解后 2-8℃保存一周；
3、标准品：10 μmol/mL 标准磷储备液；
4、工作液（定磷剂）的配制：按 H2O：试剂一：试剂二：试剂三=2:1:1:1 的比例配制，配好的工作液应为浅黄色。若变色则试剂失效，若是蓝色则为磷污染，工作液应现配现用。
注意：配试剂最好用新的烧杯、玻璃棒和玻璃移液器，也可以用一次性塑料器皿，避免磷污染。
产品说明：
速效磷是土壤中可被植物吸收的磷组分，包括全部水溶性磷、部分吸附态磷、一部分微溶性的无机磷和易矿化的有机磷等，土壤中速效磷是限制植物生长主要因子之一。
用弱碱法提取碱溶性磷和吸附态磷，钼蓝与磷酸根生成 660nm 有特征吸收峰的物质，通过测定 660nm 光吸收， 即可计算磷含量。
技术指标：
最低检出限：0.0042 μmol/mL
线性范围：0.015625-2 μmol/mL
注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
实验中所需仪器和用品：
可见分光光度计、天平、台式离心机、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、30-50目筛、漩涡震荡仪、研钵、EP 管、蒸馏水。
操作步骤：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
新鲜土样风干，过30-50目筛，按照土壤质量（g）：提取液体积(mL)为 1：10-20的比例（建议称取约0.05g土样，加入1mL提取液），振荡提取1h，10000g，25℃离心10min，取上清液待测。
二、测定步骤
1、分光光度计预热30min以上，调节波长至660nm，蒸馏水调零。
2、将10μmol/mL标准液用提取液稀释为2、1、0.5、0.25、0.125、0.0625μmol/mL的标准溶液备用。
3、标准溶液稀释表：
序号 | 稀释前浓度（μmol/mL） | 标准液体积（μL） | 提取液体积（μL） | 稀释后浓度（μmol/mL） |
1 | 10 | 100 | 400 | 2 |
2 | 2 | 250 | 250 | 1 |
3 | 1 | 250 | 250 | 0.5 |
4 | 0.5 | 250 | 250 | 0.25 |
5 | 0.25 | 250 | 250 | 0.125 |
6 | 0.125 | 250 | 250 | 0.0625 |
4、操作表：(在1.5mL离心管中
5、样本测定：(在1.5mL离心管中或96孔板依次加入下列试剂)
