人(Human)γ干扰素抗体(IFN-γAb)ELISA 检测试剂盒
使用说明书
检测原理
试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被γ干扰素抗体
(IFN-γAb)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并
彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成
最终的黄色。颜色的深浅和样品中的γ干扰素抗体(IFN-γAb)呈正相关。用酶标仪在450nm
波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法
- 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心 10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
- 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心 30 分钟取上清。
- 细胞上清液:3000 转离心 10 分钟去除颗粒和聚合物。
- 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心 10 分钟取上清。
- 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品
- 酶标仪(450nm)
- 高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL
- 37℃恒温箱
操作注意事项
- 试剂盒保存在 2-8℃,使用前室温平衡 20 分钟。从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
- 实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
- 浓度为 0 的 S0 号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释 5倍,最终结果乘以 5 才是样本实际浓度。
- 严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
- 所有液体组分使用前充分摇匀。
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| 试剂盒组成 | | | | | | |
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| 名称 | 96 孔配置 | 48 孔配置 | | 备注 | |
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| 微孔酶标板 | 12 孔×8 条 | 12 孔×4 条 | | 无 | |
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| 标准品 | 0.3mL*6 管 | 0.3mL*6 管 | | 无 | |
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| 样本稀释液 | 6mL | 3mL | | 无 | |
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| 检测抗体-HRP | 10mL | 5mL | | 无 | |
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| 20×洗涤缓冲液 | 25mL | 15mL | 按说明书进行稀释 | |
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| 底物 A | 6mL | 3mL | | 无 | |
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| 底物 B | 6mL | 3mL | | 无 | |
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