植物总酚（TP）含量检测试剂盒说明书（可见分光光度法）
产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
提取液 | 液体 60mL×1 瓶（自备） | 常温保存 |
试剂一 | 液体 20 mL×1 瓶 | 2-8℃保存 |
试剂二 | 液体 25 mL×1 瓶 | 2-8℃保存 |
标准品 | 粉剂×1 支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制：
1、 提取液：自备 60%乙醇，常温保存。
2、 标准品：5mg 没食子酸。临用前加入 1mL 蒸馏水，50℃加热溶解，配制成 5mg/mL 的标准溶液，2-8℃ 保存两周。
产品说明：
植物酚类物质具有清除自由基，抗氧化抗衰老的作用，具有较高的营养价值和医疗保健作用而广泛应用于化妆品、食品、医药等领域。
在碱性条件下，酚类物质将钨钼酸还原，产生蓝色化合物，在760nm处有特征吸收峰，测760nm处的吸光值，
即可得样本总酚含量。
OH -
Total Polyphenols + Folin-Ciocalteu → Blue Compound (760nm)
技术指标：
最低检出限：0.0012 mg/mL
线性范围：0.0024-0.156 mg/mL
注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、天平、烘箱、粉碎仪/研钵、30-50目筛、超声清洗仪、60%乙醇、台式离心机、蒸馏水。
操作步骤：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
将样本烘干至恒重，粉碎，过 30-50 目筛之后，称取约 0.1g，加入 2.5mL 提取液，用超声提取法进行提取， 超声功率 300W，温度 60℃，提取 30min。12000rpm，25℃，离心 10min，取上清，用提取液定容至 2.5mL，待测。二、测定步骤
1.分光光度计预热30min以上，调节波长至760nm，蒸馏水调零。
2.标准液的稀释：将5mg/mL没食子酸标准溶液用蒸馏水稀释至0.15625、0.078125、0.039、0.02、0.01、0.005、0.0025 mg/mL，待测。
3.标准液稀释可参考下表：
序号 | 稀释前浓度（mg/mL） | 标准液体积（μL） | 蒸馏水体积（μL） | 稀释后浓度（mg/mL） |
1 | 5 | 125 | 875 | 0.625 |
2 | 0.625 | 250 | 750 | 0.15625 |
3 | 0.15625 | 200 | 200 | 0.078125 |
4 | 0.078125 | 200 | 200 | 0.039 |
5 | 0.039 | 200 | 200 | 0.02 |
6 | 0.02 | 200 | 200 | 0.01 |
7 | 0.01 | 200 | 200 | 0.005 |
8 | 0.005 | 200 | 200 | 0.0025 |
备注：实验中每个标准管需 50μL 标准溶液。
4.操作表
试剂名称 | 对照管 | 测定管 | 标准管 | 空白管 |
样本待测液（μL） | 50 | 50 | - | - |
标准液（μL） | - | - |
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