土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（S-NAG）活性检测试剂盒说明书
可见分光光度法
产品组成：
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
试剂一 | 液体 40 mL×1 瓶 | 2-8℃保存 |
试剂二 | 粉剂×2 瓶 | -20℃保存 |
试剂三 | 液体 60 mL×1 瓶 | 2-8℃保存 |
标准品 | 液体 1 mL×1 支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制：
1、试剂二：临用前取 1 瓶加入 4 mL 蒸馏水溶解，用不完的试剂-20℃分装保存 4 周；
2、标准品：5 mmol/L 的对硝基苯酚溶液。
产品说明：
土壤N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶（S-NAG）是土壤微生物分泌的溶酶体中的一种酸性水解酶。其活性变化与机体 某些病理状态密切相关。
S-NAG分解对硝基苯β-N-乙酰氨基葡萄糖苷生成对-硝基苯酚，后者在400nm有最大吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算NAG活性。
注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰、30-50目筛、蒸馏水。
操作步骤：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献） 新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30-50目筛。
二、测定步骤
1、分光光度计预热30min，波长调至400nm，蒸馏水调零。
2、标准溶液的稀释：临用前取20μL 5 mmol/L的对硝基苯酚溶液，加入980μL试剂一，充分混匀，配制成100 μmol/L标准液使用，现用现配。（实验中每管需要500μL，为减小实验误差，故配制大体积。）
3、加样表：
试剂名称 | 测定管 | 对照管 | 标准管 | 空白管 |
风干土样（g） | 0.1 | 0.1 | - | - |
试剂一（μL） | 475 | 475 | - | - |
试剂二（μL） | 125 | - | - | - |
混匀，于37℃水浴锅/恒温培养箱反应1h 后，立即沸水 浴5min（盖紧，防止水分散失），流水/冰浴冷却 | | |
试剂二（μL） | - | 125 | - | - |
12000g 25℃离心10min，取上清液 | - | - |
上清液（μL） | 500 | 500 | - | - |
标准品（μL） | - | - | 500 | - |
蒸馏水（μL） | - | - | | 500 |
试剂三（μL） | 1000 | 1000 | 1000 | 1000 |
室温静置2min后，
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