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  • 维生素 E 含量检测试剂盒(可见分光光度法  )
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商品参数
    商品描述

    维生素 E 含量检测试剂盒说明书

    可见分光光度法

    产品组成:

    试剂名称

    规格

    保存条件

    试剂一

    液体 30 mL×1 瓶(自备)

    常温保存

    试剂二

    液体 30 mL×1 瓶(自备)

    常温保存

    试剂三

    液体 30 mL×1

    4℃保存

    试剂四

    液体 7 mL×1

    4℃保存

    试剂五

    粉剂×1

    4℃保存

    试剂六

    液体 20 mL×1

    4℃保存

    标准品

    液体 20 mg×1

    -20℃保存

    溶液的配制:

    1、试剂一:自备无水乙醇,常温保存。

    2、试剂二:自备正庚烷,常温保存。

    3、试剂五贮备液的制备:将试剂五的粉剂溶于 2 mL 无水乙醇配制成贮备液,4℃避光保存待用。

    4、试剂五应用液的制备:取试剂五贮备液用无水乙醇 20 倍稀释后使用,建议当天配制当天使用。

    5、标准品:临用前加入 1 mL 试剂三,配成 20 mg/mL 的标准品溶液。

    产品说明:

    维生素EVitamin E)是一种天然脂溶性抗氧化剂,能阻断机体不饱和脂肪酸的过氧化,维持不饱和脂肪酸细胞膜的完整性和正常功能,并可清除超氧阴离子自由基,具有延缓衰老、预防溶血性贫血等作用,在医药、化妆品、保健品、食品行业具有较高的应用价值。

    VE还原Fe3+Fe2+Fe2+1,10-菲罗啉产生有色络合物,在510 nm有特征吸收峰。

    技术指标:

    最低检出限:3.0152 μg/mL

    线性范围:3.125-50 μg/mL

    注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

    需自备的仪器和用品:

    可见分光光度计、天平、台式离心机、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、漩涡震荡仪、无水乙醇、正庚烷、蒸馏水和EP管。

    操作步骤:

    一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)

    1、组织样本

    试剂名称

    组织 (g)

    0.1

    蒸馏水 (μL)

    200

    试剂一 (μL)

    300

    试剂二 (μL)

    500

    匀浆后在漩涡混匀仪上震荡 5min(充分抽提,于 25℃5000g离心 5min,取上层正庚烷抽提液 300μL 加入到 900μL 无水乙醇中(上层抽提液:无水乙醇=1:3)混匀待测。

    注意:吸取上层正庚烷抽提液时,切勿将中间无水乙醇与水的液相层吸入。

    2、血清(血浆)样本

    试剂名称

    血清(血浆)(μL)

    200

    蒸馏水 (μL)

    200

    试剂一 (μL)

    300

    试剂二 (μL)

    500

    匀浆后在漩涡混匀仪上震荡 5min(充分抽提,于 25℃5000g离心 5min,取上层正庚烷抽提液 300μL 加入到 900μL 无水乙醇中(上层抽提液:无水乙醇=1:3)混匀待测。

    注意:离心后,吸取上层正庚烷抽提液时,切勿将中间无水乙醇与水的液相层吸入。

    二、测定步骤

    1、分光光度计预热30min以上,调节波长至510nm,无水乙醇调零。

    2、标准溶液的制备:将20mg/mL标准液用试剂三稀释为502512.56.253.125 μg/mL的标准溶液备用。

    3、操作表:(在1.5 mL离心管中依次加入下列试剂)

    试剂名称

    对照管

    测定管

    标准管

    空白管

    待测样本 (μL)

    500

    500

    -

    -

    标准溶液 (μL)

    -

    -

    500

    -

    试剂三 (μL)

    -

    -

    -

    500

    试剂四 (μL)

    100

    100

    100

    100

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