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  • 乳酸(LA)含量检测试剂盒(可见分光光度法) 科研用品
    乳酸(LA)含量检测试剂盒(可见分光光度法) 科研用品
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  • 乳酸(LA)含量检测试剂盒(可见分光光度法) 科研用品

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商品参数
    商品描述

    乳酸(LA)含量检测试剂盒说明书可见分光光度法

    产品组成:

    试剂名称

    规格

    保存条件

    提取液一

    液体 30 mL×1

    4℃保存

    提取液二

    液体 5 mL×1

    4℃保存

    试剂一

    液体 20 mL×1

    4℃保存

    试剂二

    液体 60 μL×1

    4℃保存

    试剂三

    液体 24mL×1

    4℃保存

    试剂四

    粉剂×1

    -20℃保存

    试剂五

    液体 5 mL×1

    4℃保存

    标准品

    粉剂×1

    4℃保存

    溶液的配制:

    1、试剂二:液体置于试剂瓶内 EP 管中。临用前按试剂二V):蒸馏水(V=10μL450μL 的比例配制试剂二溶液,现用现配;

    2、试剂四:临用前每瓶加入 8 mL 蒸馏水混匀,可分装后-20℃保存,避免反复冻融,-20℃保存 4 周;

    3、标准品:临用前加入 1.04 mL 蒸馏水配成 100 μmol/mL 的标准溶液;

    产品说明:

    乳酸是生物体代谢过程中重要的中间产物,与糖代谢、脂类代谢、蛋白质代谢及细胞内能量代谢密切相关, 乳酸含量是评估糖元代谢的和有氧代谢的重要指标。乳酸在乳酸脱氢酶的作用下生成丙酮酸,同时使NAD+还原生NADHH+H+传递给PMS生成的PMSH2还原MTT生成紫色物质,在570nm处有特征吸收峰。

    技术指标:

    最低检出限:0.0387 μmol/mL

    线性范围:0.039-1 μmol/mL

    注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

    需自备的仪器和用品:

    天平、研钵/匀浆器、离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、恒温水浴锅或者恒温培养箱、乙醇和蒸馏水。操作步骤:

    一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)

    1、组织:按照质量g:提取液一体积(mL)15~10的比例(建议称取约0.1g,加入1mL提取液一)加入提取液一,冰浴匀浆后于4℃12000g离心10min,取0.8mL上清液,再加入0.15mL提取液二,4℃12000g离心10min 后取上清待测。2、细胞:按照细胞数量104:提取液一体积mL)为500~10001的比例(建议500万细胞加入1mL提取液,冰浴超声波破碎细胞(功率300w,超声3秒,间隔7秒,总时间3min);4℃12000g离心10min,取0.8mL 上清液,再加入0.15mL提取液二,4℃ 12000g离心10min后取上清待测。

    3、血清(浆):100μL血清(浆加入1mL提取液一,4℃12000g离心10min,取0.8mL上清液,再加入0.15mL 提取液二,12000g离心10min后取上清待测。

    二、测定步骤

    1、分光光度计预热30min以上,波长调至570nm,乙醇调零。

    2、标准液的稀释:将100μmol/mL的标准溶液用蒸馏水稀释为10.6250.31250.156250.0780.039μmol/mL

    的标准溶液待测。

    3、加样表:

    测定管

    对照管

    标准管

    空白管

    样本(μL

    50

    50

    -

    -

    标准品(μL

    -

    -

    50

    -

    蒸馏水(μL

    • 购买人 会员级别 数量 属性 购买时间
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