土壤蔗糖酶( S-SC)活性检测试剂盒说明书
可见分光光度法
产品组成:
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
试剂一 | 液体 5 mL×1 瓶(自备) | 2-8℃保存 |
试剂二 | 液体 15 mL×1 瓶 | 2-8℃保存 |
试剂三 | 粉剂×2 瓶 | 2-8℃保存 |
试剂四 | 液体 35 mL×1 瓶 | 2-8℃保存 |
标准品 | 粉剂×1 支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
1、试剂一:自备甲苯;
2、试剂三:临用前取 1 瓶加入 15 mL 蒸馏水充分溶解备用,用不完的试剂 2-8℃保存 2 周;
3、标准品:含 10 mg 无水葡萄糖(干燥失重<0.2%)。临用前加入 1 mL 蒸馏水溶解备用,2-8℃可保存 2 周, 或者用饱和苯甲酸溶液溶解,可保存更长时间。
产品简介:
S-SC 能够水解蔗糖变成相应的单糖而被机体吸收,其酶促作用产物与土壤中有机质、氮、磷含量,微生物数量及土壤呼吸强度密切关,是评价土壤肥力的重要指标。
S-SC 催化蔗糖降解产生还原糖,进一步与 3,5-二硝基水杨酸反应,生成棕红色氨基化合物,在 540nm 有特征光吸收,在一定范围内 540nm 光吸收增加速率与 S-SC 活性成正比。
注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、台式离心机、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、30-50 目筛、冰、研钵、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。
操作步骤:
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献) 新鲜土样自然风干或 37 度烘箱风干,研磨,过 30-50 目筛。
二、测定步骤
1、分光光度计预热 30min 以上,调节波长至 540nm,蒸馏水调零。
2、标准品准备:将标准品用蒸馏水稀释至 0.5、0.4、0.3、0.2、0.1 mg/mL,可参考下表。
序号 | 稀释前浓度(mg/mL) | 标准液体积(μL) | 蒸馏水体积(μL) | 稀释后浓度(mg/mL) |
1 | 10 | 100 | 900 | 1 |
2 | 1 | 250 | 250 | 0.5 |
3 | 1 | 200 | 300 | 0.4 |
4 | 1 | 150 | 350 | 0.3 |
5 | 1 | 100 | 400 | 0.2 |
6 | 1 | 50 | 450 | 0.1 |
备注:实验中每个标准管需 200μL 标准溶液。
3、加样表:
试剂名称 | 测定管 | 对照管 | 标准管 | 空白管 |
风干土样(g) | 0.1 | 0.1 | - | - |
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