水样中汞离子（Hg2+）浓度检测试剂盒
可见分光光度法
产品组成：
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
试剂一 | 粉剂×1 瓶 | 4℃保存 |
试剂二 | 液体 5 mL×1 瓶 | 4℃保存 |
试剂三 | 液体 12 mL×1 瓶 | 4℃保存 |
试剂四 | 粉剂×1 瓶 | 4℃保存 |
试剂五 | 粉剂×1 瓶 | 4℃保存 |
试剂六 | 液体 20 mL×1 瓶 | 4℃保存 |
标准品 | 液体 1 mL×1 支 | 常温保存 |
溶液的配制：
1、 试剂一：临用前加入 2 mL 蒸馏水溶解；
2、 试剂四：临用前加入 5 mL 蒸馏水充分溶解待用；
3、 试剂五：加三氯甲烷（自备）50 mL 充分溶解；
4、 标准品： 4000 nmol/mL Hg2+。临用前用水稀释 400 倍即 10 nmol/mL 标准溶液备用。
产品说明：
Hg2+是水体中重要有毒重金属离子，易被生物体吸收并且积累，能够通过食物链进一步传递，从而造成伤害。典型的水俣病就是汞中毒的一种。
水样经消化后，在酸性环境中，Hg2+能与二硫腙生成橙色络合物，溶于三氯甲烷，在490nm测定吸光度，即可计算Hg2+含量。
注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
台式离心机、可见分光光度计、水浴锅、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、三氯甲烷（氯仿）、浓硫酸、浓硝酸、蒸馏水。
操作步骤：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
每采集1000mL水样后立即加入7mL硝酸，调节每个样本的pH，使之低于或等于1。若取样后不能立即测量， 向每升样本中加入试剂二4mL或更多，使之呈现持久的淡红色。
二、测定步骤
1、可见分光光度计预热 30min 以上，调节波长至 490nm，氯仿调零。
2、操作表（在 5mLEP 管中分别加入）：
试剂名称（μL） | 测定管 | 标准管 | 空白管 |
水样 | 1000 | - | |
标准溶液 | - | 1000 | |
蒸馏水 | - | - | 1000 |
浓硫酸 | 40 | 40 | 40 |
浓硝酸 | 10 | 10 | 10 |
试剂一 | 32 | 32 | 32 |
试剂二 | 60 | 60 | 60 |
封口膜封口，充分混匀，震荡 2min。95℃水浴中消化 2 小时，冷却至大约 40℃。 |
试剂三 | 200 | 200 | 200 |
震荡至 EP 管内溶液澄清透明，开盖放置 10min，期间摇荡数次，使其中气体溢出。 |
试剂四 | 80 | 80 | 80 |
试剂五 | 1000 | 1000 | 1000 |
盖紧后充分震荡 2min，静置 10min，吸取下层有机相 900μL 至 1.5mL EP 管中。 |
试剂六 | 400 | 400 | 400 |
充分震荡使有机相无绿色，静置分层后吸取有机相测定其在 490nm 波长下的吸光度，分别记为 A 测定， A 标准，A 空白，计算 ΔA 测定=A 测定-A 空白，ΔA 标准=A 标准-A 空白。 |
三、汞离子浓度计算
