产品组成:
试剂名称 | 规格 | 保存条件 |
试剂一 | 液体 10 mL×1 瓶(自备) | 2-8℃保存 |
试剂二 | 粉剂×2 瓶 | 2-8℃保存 |
试剂三 | 液体 10 mL×1 瓶 | 2-8℃保存 |
试剂四 | 粉剂×1 瓶 | 2-8℃保存 |
试剂五 | 粉剂×1 瓶 | 2-8℃保存 |
试剂六 | 液体 10 mL×1 瓶 | 常温保存 |
标准品 | 粉剂×1 支 | 2-8℃保存 |
溶液的配制:
1、试剂一:浓硫酸 10 mL 自备。
2、试剂二:每瓶临用前加入 15 mL 蒸馏水溶解备用,溶解后 2-8℃保存一周。
3、试剂四:临用前加入 10 mL 蒸馏水,溶解后 2-8℃保存两周。
4、试剂五:临用前加入 10 mL 蒸馏水,溶解后 2-8℃保存两周。
5、标准品:临用前加入 1.4 mL 下述稀释液溶解粉剂,配成 20μmol/mL 的磷标准液,2-8℃保存两周。
6、稀释液的配制:按蒸馏水体积(mL):试剂一体积(mL):试剂二体积(mL)=10:1:2的比例混合即可,现用现配。
7、定磷试剂的配制:按 H2O:试剂四:试剂五:试剂六(V:V:V:V)=2:1:1:1 的比例配制,配好的工作液应为浅黄色。若变色则试剂失效,若是蓝色则为磷污染,工作液应现配现用。
注意:配试剂最好用新的烧杯、玻璃棒和玻璃移液器,也可以用一次性塑料器皿,避免磷污染。
产品说明:
总磷酸盐包含正磷酸盐、偏磷酸盐、焦磷酸盐、多聚磷酸盐等各种磷酸盐的形式,反应了水土中的磷酸盐水平,是一个水质和土壤质量评价的重要指标。
在酸性溶液中,在分解剂和高温条件下,将无机磷酸盐和有机磷酸盐水解成正磷酸盐,正磷酸盐可与钼酸铵反应成磷钼酸,在还原剂存在时被还原为磷钼蓝,在660nm处有特征吸收峰。
技术指标:
最低检出限:0.0065 μmol/mL
线性范围:0.0098-1.25 μmol/mL
注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、天平、台式离心机、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、30-50目筛、漩涡震荡仪、研钵、EP 管、蒸馏水、浓硫酸。
操作步骤:
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
1、水样:按照水样体积(mL):试剂一体积(mL):试剂二体积(mL)为10:1:2的比例(建议取1mL水样,加入100μL试剂一和200μL试剂二),用封口膜封口。95℃水浴30min,冷却后待测。
2、土样:(1)新鲜土样风干,过30-50目筛;(2)按照风干土壤质量(g):蒸馏水体积(mL):试剂一体积(mL):试剂二体积(mL)=1:10:1:2(建议称取约0.1g土样,加入1mL蒸馏水,再加入100μL试剂一和200μL试剂二),用封口膜封口。95℃水浴振荡 30min,10000g,25℃离心 10min,取上清液待测。
二、测定步骤
1、分光光度计预热30min以上,调节波长至660nm,蒸馏水调零。
2、将20μmol/mL标准液用稀释液稀释为1.25、0.625、0.3125、0.15625、0.078125、0.039、0.02μmol/mL的标准溶液备用。
3、标准溶液稀释表:
序号 | 稀释前浓度(μmol/mL) | 标准液体积(μL) | 稀释液体积(μL) | 稀释后浓度(μmol/mL) |
1 | 20 | 25 | 375 | 1.25 |
2 | 1.25 | 200 | 200 | 0.625 |
3 | 0.625 | 200 | 200 | 0.3125 |
4 |
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