脂肪酸合成酶（FAS）活性检测试剂盒说明书 紫外分光光度法
产品内容：
试剂名称 | 10T/9S 规格 | 25T/24S 规格 | 50T/48S 规格 | 保存条件 |
提取液 | 液体 15 mL×1 瓶 | 液体 30 mL×1 瓶 | 液体 60 mL×1 瓶 | 4℃保存 |
试剂一 | 粉剂×1 支 | 粉剂×2 支 | 粉剂×2 瓶 | -20℃保存 |
试剂二 | 粉剂×1 支 | 粉剂×2 支 | 粉剂×2 瓶 | -20℃保存 |
试剂三 | 液体 15 mL×1 瓶 | 液体 30 mL×1 瓶 | 液体 55 mL×1 瓶 | 4℃保存 |
试剂四 | 粉剂×1 支 | 粉剂×2 支 | 粉剂×2 支 | -20℃保存 |
10T/9S 规格溶液的配制：
1、试剂一：临用前取一支加入 1.25 mL 试剂三，充分溶解，用不完的试剂-20℃分装保存 2 周，禁止反复冻融。
2、试剂二：临用前取一支加入 1.25 mL 试剂三，充分溶解，用不完的试剂-20℃分装保存 2 周，禁止反复冻融。
3、试剂四：临用前取一支加入 500 μL 试剂三，充分溶解，用不完的试剂-20℃分装保存 2 周，禁止反复冻融。25T/24S 规格溶液的配制：
1、试剂一：临用前取一支加入 1.25 mL 试剂三，充分溶解，用不完的试剂-20℃分装保存 2 周，禁止反复冻融。
2、试剂二：临用前取一支加入 1.25 mL 试剂三，充分溶解，用不完的试剂-20℃分装保存 2 周，禁止反复冻融。
3、试剂四：临用前取一支加入 0.6 mL 试剂三，充分溶解，用不完的试剂-20℃分装保存 2 周，禁止反复冻融。
50T/48S 规格溶液的配制：
1、试剂一：临用前取一支加入 2.5 mL 试剂三，充分溶解，用不完的试剂-20℃分装保存 2 周，禁止反复冻融。
2、试剂二：临用前取一支加入 2.5 mL 试剂三，充分溶解，用不完的试剂-20℃分装保存 2 周，禁止反复冻融。
3、试剂四：临用前取一支加入 1.25 mL 试剂三，充分溶解，用不完的试剂分装后-20℃保存 2 周，禁止反复冻融。
产品说明：
脂肪酸合成酶（Fatty acid synthetase，FAS）是一种关于脂肪酸再生能力并起重要作用的限速酶，它通过催化丙二酰辅酶Ａ、乙酰辅酶 A 和 NADPH 生成长链脂肪酸和 NADP+，NADPH 在 340nm 条件下有特征吸收峰。通过检测 340nm 条件下吸光值的下降速率，可以计算出 FAS 活性。
注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：
紫外分光光度计、超声波细胞破碎仪、水浴锅/培养箱、低温离心机、可调式移液器、1 mL 石英比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）
1、细菌、细胞样本的制备：按照细胞数量（104 个）: 提取液体积（mL）为 500~1000 : 1 的比例（建议 500万细胞加入 1 mL 提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率 300W，超声 3 秒，间隔 9 秒，总时间 5 min）；于 4℃，12000 g
离心 20 min，取上清液，置于冰上待测。
2、组织样本的制备：按照质量（g）: 提取液一体积(mL)为 1: 5~10 的比例（建议称取约 0.1 g 组织，加入 1mL提取液）加入提取液，冰浴匀浆后于 4℃，12000 g 离心 20 min，取上清液，置于冰上待测。
3、血清（浆）等液体样本：直接测定。
二、测定步骤
1、紫外分光光度计预热 30 min 以上，调节波长至 340 nm，蒸馏水调零。
2、试剂三临用前置于 37℃（哺乳动物）或 25℃（其他物种）中预热 15 min。
3、加样表（在比色皿中加入下列试剂）
试剂名称 | 测定管 | 空白管 |
上清液 | 100 | - |
蒸馏水 | - | 100 |
试剂一 | 80 | 80 |
试剂二 | 80 | 80 |
试剂三 | 700 | 700 |
试剂四 | 40 | 40 |
迅速吹打混匀，记录第 15s 的吸光值 A1 测定（A1 空白），和 1min15s 时的吸光值 A2 测定（A2 空白）， 计算 ΔA =（A1
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